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成年大鼠心肌细胞的分离和培养
2020-01-09  浏览:95
建立获得较高比例的活性成年大鼠心肌细胞的分离和培养方法。方法:Langendorff灌流,胶原酶消化分离钙耐受成年大鼠心肌细胞,加血清培养。光镜观察,结合形态学和台盼蓝染色评价心肌细胞。
结果:分离的活性心肌细胞比率约70%-80%,杆状、横纹清晰。加血清贴壁培养的细胞逐渐发生形态学改变。
结论:通过本方法可以对成年大鼠心肌细胞进行良好的分离培养。



相关建材词条解释:

心肌细胞

根据它们的组织学特点、电生理特性以及功能上的区别,粗略地分为两大类型:两类心肌细胞分别实现一定的职能,互相配合,完成心脏的整体活动。一类是普通的心肌细胞,包括心房肌和心室肌,含有丰富的肌原纤维,执行收缩功能,故又称为工作细胞。工作细胞不能自动地产生节律性兴奋,即不具有自动节律性;但它具有兴奋性,可以在外来刺激作用下产生兴奋;也具有传导兴奋的能力,但是,与相应的特殊传导组织作比较,传导性较低。另一类是一些特殊分化了的心肌细胞,组成心脏的特殊传导系统;其中主要包括P细胞和哺肯野细胞,它们除了具有兴奋性和传导性之外,还具有自动产生节律性兴奋的能力,故称为自律细胞,它们含肌原纤维甚小或完全缺乏,故收缩功能已基本丧失。还有一种细胞位于特殊传导系统的结区,既不具有收缩功能,也没有自律性,只保留了很低的传导性,是传导系统中的非自律细胞,特殊传导系统是心脏内发生兴奋和传播兴奋的组织,起着控制心脏节律性活动的作用。

大鼠

大鼠1.大鼠性哺乳纲,啮齿目,鼠科,大鼠属动物。2.繁殖快。大鼠2月龄时性成熟,性周期4天左右,妊娠期20(19~22)天,哺乳期21天,每胎产仔平均8只,为全年、多发情性动物。3.喜啃咬、夜间活动、肉食,白天喜欢挤在一起休息,晚上活动大,吃食多,因此白天除实验必须抓取外,一般不要抓弄它。食性广泛,喜吃各种煮熟的动物肉。对光照较敏感。4.无胆囊:大鼠、鸽、鹿、马、驴、象等动物没有胆囊,它们的总胆肝管括约肌的阻力很少,肝分泌的胆汁通过总胆管进入十二指肠,受十二指肠端括约肌的控制。5.不能呕吐:因此药理实验时应予注意。6.垂体一肾上腺系统功能发达,应激反应灵敏。行为表现多样,情绪敏感。7.视觉、嗅觉较灵敏,做条件反射等实验反应良好,但对许多药物易产生耐药性。8.大鼠血压和血管阻力对药物反应敏感,但对强心甙的作用较猫敏感性低671倍。9.肝脏再生能力强,切除60~70%的肝叶仍有再生能力。10.对营养、维生素、氨基酸缺乏敏感,可发生典型的缺乏症状。体内可以合成维生素C。11.对炎症反应灵敏。它的眼角膜无血管。12.生长发育期长,长骨长期有骨骺线存在,不骨化。13.成年雌鼠在动情周期不同阶段,阴道粘膜可发生典型变化,采用阴道涂片法(YaginalSmearTest)来观察性周期中阴道上皮细胞的变化,可推知性周期各个时期中卵巢、子宫状态与垂体激素的变动。大鼠

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